Magnētiskā uztriepju DNS komplekts

A-1 Zema šūnu vai vīrusa koncentrācija sākuma paraugā-bagātiniet šūnu vai vīrusu koncentrāciju.

A-2 Nepietiekama paraugu līze-Paraugi nav rūpīgi sajaukti ar līzes buferšķīdumu. Ieteicams rūpīgi samaisīt, 1-2 reizes pulsējot. - Nepietiekama šūnu līze, ko izraisa proteināzes K aktivitātes samazināšanās. Ieteicams audus sagriezt mazos gabaliņos un pagarināt vannas laiku, lai noņemtu visus atlikumus lizātā.

A-3 Nepietiekama DNS adsorbcija. -Pirms lizāta pārnešanas uz centrifūgas kolonnu netika pievienots etanols vai zems procentuālais daudzums 100% etanola vietā.

A-4 Eluācijas bufera pH vērtība ir pārāk zema. -Pielāgojiet pH vērtību no 8,0 līdz 8,3.

Etanola atlikumi eluentā.

- eluentā ir atlikušais mazgāšanas buferšķīdums PW. Etanolu var noņemt, centrifugējot centrifugēšanas kolonnu 3-5 minūtes un pēc tam ievietojot istabas temperatūrā vai 50 ° C inkubatorā 1-2 minūtes.

A-1 Paraugs nav svaigs. - Izņemiet pozitīvu parauga DNS kā kontroli, lai noteiktu, vai paraugā esošā DNS ir degradējusies.

A-2 Nepareiza pirmapstrāde. - izraisa pārmērīga šķidrā slāpekļa slīpēšana, mitruma atgūšana vai pārāk liels parauga daudzums.

Iepriekšējai apstrādei dažādiem paraugiem vajadzētu atšķirties. Augu paraugus noteikti rūpīgi sasmalciniet šķidrā slāpeklī. Dzīvnieku paraugiem homogenizējiet vai rūpīgi sasmalciniet šķidrā slāpeklī. Paraugiem ar grūti sadalāmām šūnu sieniņām, piemēram, G+ baktērijām un raugam, tiek ieteikts izmantot lizocīmu, lizikāzi vai mehāniskas metodes, lai salauztu šūnu sienas.

4992201/4992202 Augu genoma DNS komplektā tiek izmantota kolonnas metode, kuras ekstrakcijai nepieciešams hloroforms. Tas ir īpaši piemērots dažādiem augu paraugiem, kā arī augu sausajam pulverim. Hi-DNAsecure augu komplekts ir balstīts arī uz kolonnām, bet bez fenola/hloroforma ekstrakcijas, padarot to drošu un netoksisku. Tas ir piemērots augiem ar augstu polisaharīdu un polifenolu saturu. 4992709/4992710 DNSquick augu sistēma izmanto uz šķidrumiem balstītu metodi. Fenola/hloroforma ekstrakcija arī nav nepieciešama. Attīrīšanas procedūra ir vienkārša un ātra, un parauga sākuma daudzumam nav ierobežojumu, tāpēc lietotāji var elastīgi pielāgot daudzumu atbilstoši eksperimentālajām prasībām. Ar lielu ražu var iegūt lielu gDNS fragmentu izmēru.

Genomiskā DNS tika iegūta no dažādiem cilvēka pilno asins paraugu apjomiem, izmantojot TIANamp asins DNS komplektu. Rezultāti ir šādi. Rezultāti ir norādīti tikai kā atsauce, faktiskie ekstrakcijas rezultāti ir atkarīgi no paraugu apstākļiem.

Asins recekļa DNS ekstrakciju var veikt, izmantojot šajos divos komplektos esošos reaģentus, vienkārši mainot protokolu uz īpašiem norādījumiem par asins recekļa DNS ekstrakciju. Asins recekļa DNS ekstrakcijas protokola mīksto kopiju var izsniegt pēc pieprasījuma.

Svaigo paraugu suspendē ar 1 ml PBS, parastā fizioloģiskā šķīduma vai TE buferšķīduma. Pilnībā homogenizējiet paraugu ar homogenizatoru un nogulsnes savāciet mēģenes apakšā, centrifugējot. Izmetiet supernatantu un atkārtoti suspendējiet nogulsnes ar 200 μl buferšķīduma GA. Sekojošo DNS attīrīšanu var veikt saskaņā ar instrukciju.

GDNS attīrīšanai plazmas, seruma un ķermeņa šķidruma paraugos ieteicams izmantot TIANamp Micro DNS komplektu. Lai attīrītu gDNS no seruma/plazmas paraugiem, ieteicams izmantot TIANamp vīrusa DNS/RNS komplektu. Lai attīrītu baktēriju gDNS no seruma un plazmas paraugiem, ieteicams izmantot TIANamp baktēriju DNS komplektu (pozitīvu baktēriju gadījumā jāiekļauj lizocīms). Siekalu paraugiem ieteicams izmantot Hi-Swab DNS komplektu un TIANamp baktēriju DNS komplektu.

Sēnīšu genoma iegūšanai ieteicams izmantot DNSsecure Plant Kit vai DNAquick Plant System. Rauga genoma ekstrakcijai ieteicams izmantot TIANamp rauga DNS komplektu (lizātam jābūt gatavam pašam).