RNAprep tīru audu komplekts

Kopējās RNS attīrīšanai no dzīvnieku audiem līdz 100 μg.

RNAprep Pure Tissue Kit nodrošina ātru, vienkāršu un rentablu metodi kopējās RNS attīrīšanai no dzīvnieku audiem, izmantojot efektīvu centrifūgas kolonnu un unikālu buferšķīduma sistēmu. Komplektā ietilpst griešanās kolonnas CRNase bez CR3 augstas kvalitātes RNS attīrīšanai, izmantojot silīcija dioksīda membrānas tehnoloģiju. Augstas kvalitātes kopējo RNS var iegūt 40–50 minūtēs ar augstu tīrības pakāpi, un tajā nav olbaltumvielu un genoma DNS piesārņojuma.

Kaķis Nē Iepakojuma izmērs
4992236  50 sagatavošanās

Produkta detaļas

Eksperimentāls piemērs

Bieži uzdotie jautājumi

Produktu birkas

Iespējas

■ Optimizēti buferi dzīvnieku audiem padara procesu vienkāršu un ērtu.
■ Unikālā DNāze I samazina genoma DNS piesārņojumu.
■ Augstākas tīrības pakāpes un lietošanai gatava RNS ir piemērota jutīgiem pakārtotiem lietojumiem.
■ Nav nepieciešama fenola/hloroforma ekstrakcija, nav LiCl un etanola nogulsnēšanās, un nav nepieciešama centrifugēšana ar CsCl gradientu, kas padara procesu drošu un uzticamu.

Lietojumprogrammas

■ RT-PCR.
■ Northern Blot, Dot Blot.
■ Reālā laika PCR.
■ mikroshēmu analīze.
■ PolyA skrīnings, in vitro tulkošana, RNāzes aizsardzības analīze un molekulārā klonēšana.

Visus produktus var pielāgot ODM/OEM. Lai iegūtu sīkāku informāciju,lūdzu, noklikšķiniet uz Pielāgots pakalpojums (ODM/OEM)


  • Iepriekšējais:
  • Nākamais:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental ExampleExperimental Example Materiāls: 20 mg embrijs (13 dienas), 15 mg nieres, 10 mg aknas, 15 mg liesa, 10 mg aizkrūts dziedzeris, 20 mg plaušas
    Metode: Kopējā RNS no dažādiem žurku audu paraugiem tika attīrīta, izmantojot RNAprep Pure Tissue Kit.
    Rezultāti: Agarozes gēla elektroforēzes attēls ir parādīts iepriekš. Katrā joslā tika ielādēti 2-4 μl 100 μl eluātu.
    M: TIANGEN DNS marķieris III;
    1-2. Josla: embrijs (13 dienas); 3. josla: nieres; 4.-6. Josla: aknas; 7. josla: liesa; 8. josla: Thymus; 9. josla: plaušas.
    Elektroforēze tika veikta pie 6 V/cm 30 minūtes ar 1% agarozes gelu.

     

     

     

    J: Kolonnas bloķēšana

    A-1 Šūnu līze vai homogenizācija nav pietiekama

    ---- Samaziniet paraugu izmantošanu, palieliniet līzes bufera daudzumu, palieliniet homogenizācijas un līzes laiku.

    A-2 Parauga daudzums ir pārāk liels

    ---- Samaziniet izmantotā parauga daudzumu vai palieliniet līzes bufera daudzumu.

    J: Zema RNS raža

    A-1 Nepietiekama šūnu līze vai homogenizācija

    ---- Samaziniet paraugu izmantošanu, palieliniet līzes bufera daudzumu, palieliniet homogenizācijas un līzes laiku.

    A-2 Parauga daudzums ir pārāk liels

    ---- Lūdzu, skatiet maksimālo apstrādes jaudu.

    A-3 RNS netiek pilnībā eluēta no kolonnas

    ---- Pēc ūdens pievienošanas bez RNāzes, pirms centrifugēšanas atstājiet to dažas minūtes.

    A-4 Etanols eluentā

    ---- Pēc skalošanas vēlreiz centrifugējiet un pēc iespējas noņemiet mazgāšanas buferi.

    A-5 Šūnu barotne nav pilnībā izņemta

    ---- Savācot šūnas, lūdzu, pēc iespējas noņemiet barotni.

    A-6 RNSstore uzglabātās šūnas netiek efektīvi centrifugētas

    ---- RNSstore blīvums ir lielāks nekā vidējā šūnu barotne; tāpēc jāpalielina centrbēdzes spēks. Ieteicams centrifugēt ar ātrumu 3000x g.

    A-7 Zems RNS saturs un pārpilnība paraugā

    ---- Izmantojiet pozitīvu paraugu, lai noteiktu, vai paraugu ir izraisījusi zemā raža.

    J: RNS degradācija

    A-1 Materiāls nav svaigs

    ---- Svaigi audi nekavējoties jāuzglabā šķidrā slāpeklī vai nekavējoties jāievieto RNSstore reaģentā, lai nodrošinātu ekstrakcijas efektu.

    A-2 Parauga daudzums ir pārāk liels

    ---- Samaziniet parauga daudzumu.

    A-3 RNāzes piesārņojumsn

    ---- Lai gan komplektā esošais buferšķīdums nesatur RNāzi, ekstrahēšanas procesā RNāzi ir viegli piesārņot, un ar to jārīkojas uzmanīgi.

    A-4 Elektroforēzes piesārņojums

    ---- Nomainiet elektroforēzes buferi un pārliecinieties, vai palīgmateriālos un iekraušanas buferī nav RNāzes piesārņojuma.

    A-5 Pārāk liela slodze elektroforēzei

    ---- Samaziniet parauga iekraušanas apjomu, katras iedobes slodze nedrīkst pārsniegt 2 μg.

    J: DNS piesārņojums

    A-1 Parauga daudzums ir pārāk liels

    ---- Samaziniet parauga daudzumu.

    A-2 Dažiem paraugiem ir augsts DNS saturs, un tos var apstrādāt ar DNāzi.

    ---- Veiciet ar RNāzi nesaturošu DNāzes apstrādi iegūtajam RNS šķīdumam, un RNS var tieši izmantot turpmākiem eksperimentiem pēc apstrādes, vai arī to var tālāk attīrīt ar RNS attīrīšanas komplektiem.

    J: Kā noņemt RNāzi no eksperimentālajiem palīgmateriāliem un stikla izstrādājumiem?

    Stikla izstrādājumiem, kas cepti 150 ° C temperatūrā 4 stundas. Plastmasas traukiem 10 minūtes iegremdē 0,5 M NaOH, pēc tam rūpīgi noskalo ar ūdeni bez RNāzes un pēc tam sterilizē, lai pilnībā noņemtu RNāzi. Eksperimentā izmantotajiem reaģentiem vai šķīdumiem, īpaši ūdenim, jābūt bez RNāzes. Visiem reaģentu preparātiem izmantojiet ūdeni bez RNāzes (pievienojiet ūdeni tīrai stikla pudelei, pievienojiet DEPC līdz galīgajai koncentrācijai 0,1% (V/V), sakratiet nakti un autoklāvējiet).

    Uzrakstiet savu ziņu šeit un nosūtiet to mums